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비병원성 야생효모 Candida oleophila WP5-19- 1로부터 장내유용세균 유해 효소 β-glucuronidase 저해제의 생산 및 특성
Production and Characterization of the Beneficial β-glucuronidase Inhibitor from non pathogenic wild yeast, Candida oleophila WP5-19-1, and its effects on gut microbes
비병원성 야생효모로부터 대장에서의 독성물질 활성화에 관여하여 대장암을 유발시키는 효소 중의 하나인 β-glucuronidase를 저해하는 물질을 생산하기 위하여 대전광역시 월평공원으로부터 분리 동정한 야생효모들 중 비병원성 야생효모들을 선별하여 배양 상등액과 무세포 추출물을 각각 제조한 후 β-glucuronidase 저해활성을 측정하였다. 133균주의 비병원성 야생효모들 중C. oleophila WP5-19-1의 무세포추출물이 49.0%의 가장 높은 저해활성을 보여 우수 균주로 최종 선발하였다. β-Glucuronidase 저해물질 최적 생산 조건은C. oleophila WP5-19-1를 초기 pH를 6.0으로 조정한 dextrose 5% 함유한 potato dextrose 배지에 접종하여 30℃에서 24시간 배양하였을 때였고 이때 IC50값; 8.4 mg으로 가장 높은 저해활성을 보였다. C. oleophila WP5-19-1의 β-glucuronidase 저해물질을 한외여과와 Sephadex G-50으로 gel 여과를 실시하여 부분 정제하였고 이들은 30-60℃, pH 6.0-9.0에서 80% 이상의 잔존 저해활성을 보여 안정하였다. 또한 철, 구리, 아연과 같은 중금속 이온들은 저해활성을 활성화시켰다.
We aimed to produce a potent β-glucuronidase inhibitor from wild yeast that could inactivate toxic substances in the colon. Culture supernatants and cell-free extracts of non-pathogenic wild yeasts were prepared and their β-glucuronidase inhibitory activities were measured. Cell-free extract from Candida oleophila WP5-19-1 showed the highest β-glucuronidase inhibitory activity (49.0%). The β-glucuronidase inhibitor was maximally produced (IC50 value; 8.4 mg) when C. oleophila WP5-19-1 was cultured in potato dextrose medium containing 5% dextrose (initial pH; 6.0) at 30℃ for 24 hours. β-glucuronidase inhibitor of C. oleophila WP5-19-1 was partially purified by trypsin hydrolysis, ultrafiltration (3 kDa), and Sephadex G-50 filtration. The partially purified β-glucuronidase inhibitor was stable from 30℃ to 60℃ and at pH 6.0 9.0, and showed residual inhibitory activity of about 80%.
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간행물정보
: 자연과학분야 > 생물
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: SCOPUS
: 계간
: 0253-651x
: 2383-5249
: 학술지
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