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Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry Analysis for Molecular Characterization of Chitosan

Sang Hun Jung , Yong Hyun Lee , Dae Young Jeong , Yoo Ra Jeong , Byoung Ok Jung , Jae Kweon Park
  • : 한국키틴키토산학회
  • : 한국키틴키토산학회지 26권2호
  • : 연속간행물
  • : 2021년 06월
  • : 76-82(7pages)
한국키틴키토산학회지

DOI

10.17642/jcc.26.2.5


목차

Introduction
Materials and Methods
Results and Discussion
Conclusion
Authorship contribution statement
Compliance with ethical standards
Acknowledgements
Reference

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Chitosan oligosaccharides designated to COS were derived from the hydrolysis of high molecular weight chitosan (HMWC). The range of molecular weight of COS was estimated to be approximately 0.5 to 2.5 kDa after the fractionation performed through gel-filtration, followed by MALDI-TOF mass spectrometry analysis. It was confirmed through the results that significant separation or fractionation was not observed well. Also, both dialyzed COS using a 12~14 kDa molecular weight cut-off (MWCO) membrane and salting-out COS were also showed no significant difference in the molecular weight of COS by MALDI-TOF mass spectrometry analysis. These results suggested that it is difficult to separate the chitosan hydrolysates bigger than 1 kDa according to the size (6-glucosamine) due to their high affinity between molecules which may tightly be associated together by hydrophobic or van der Waals force. Therefore, further examination on chitosan hydrolysis and fractionation for the production of COS with various sizes i.e., 7 or 8 units of glucosamine in large-scale, should be carefully considered for various applications.

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간행물정보

  • : 자연과학분야  > 생물
  • : KCI등재
  • :
  • : 계간
  • : 1229-4160
  • :
  • : 학술지
  • : 연속간행물
  • : 1996-2021
  • : 1087


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26권3호(2021년 09월) 수록논문
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1Antifungal Activity of Chitinase- and Chitosanase-Producing Rhizosphere Bacteria

저자 : Philip Ahn , Dong-jun Seo , Yong-su Song , Woo-jin Jung

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 3호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 93-100 (8 pages)

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In this study, the chitinolytic activity of rhizosphere bacteria was detected on a 0.2% colloidal chitin agar medium. A zone of clearance indicating chitinase activity was observed around the discs in Paenarthrobacter nicotinovorans, Chitinophaga oryziterrae, and Bacillus stratosphericus. For the determination of the pH stability of the bacterial chitinase, the three bacterial isolates were incubated at different pH ranges from pH 3~7. All three isolates showed the highest chitinase activity at pH 4. Five chitinase isozymes (66, 57, 49, 45 and 36 kDa) and one chitosanase (40 kDa) were detected in P. nicotinovorans. While C. oryziterrae did not. P. nicotinovorans showed the highest antifungal activity on PDA against Botrytis cinerea and Colletotirchum higginisianum. However, in the potato dextrose broth, C. oryziterrae showed the highest antifungal activity based on the fungal mycelial dry weight measurement. These results indicate that three chitinase-producing rhizosphere bacteria can potentially be used as biocontrol agents in agricultural applications.

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2국내 해양자원 유래 가축사료 연구 분석

저자 : 최혁 ( Hyuck Choi )

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 3호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 101-108 (8 pages)

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This review provides an overview of research data form published journal and thesis using feed stuff derived from marine resources and current status of pet food. Marine feed stuff has been widely used as livestock feed for a traditionally in Korea. However, due to the production and price of marine feed stuff, the amount used as a formula feed is very low. Results of this study showed that marine feed stuff have sufficient nutritional value as a livestock feed, and thus could replace imported grain feed. Furthermore, expect to many uses of pet food. These feed stuff derived from marine resources are eventually cost-effective for livestock farmers. In addition, there is a high possibility of developing new products for pet food. However, which has a small amount of marine resources production and insufficient basic research to be used as formula feed industry. Therefore, suggest that best efforts to should be made to improve the quality of livestock products using marine feed stuff along with the development of mass production technology of marine resources.

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3키토산, 녹차 및 강황 함유 피조개(Scapharca broughtonii) 소시지의 항산화, 조직 및 저장 특성

저자 : 박예은 ( Ye-eun Park ) , 정범균 ( Beom-gyun Jeong ) , 천지연 ( Jiyeon Chun )

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 3호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 109-117 (9 pages)

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본 연구에서는 피조개로 돈육을 대체하고 기능성 키토산, 녹차, 강황 첨가제를 활용하여 소시지를 제조한 후 이들의 항산화능, 조직감 및 저장 안정성을 분석 비교하였다. 조리 후 수분 함량과 소시지의 붉은 색도는 피조개 소시지가 돈육 소시지에 비해 높게 나타나 피조개 첨가에 의한 수분 보유력 및 색도 개선이 향상되는 것으로 나타났다. 피조개 소시지의 색도는 피조개 첨가 시 낮은 명도 값을 보였지만 적색도 값은 높아진 것으로 나타났다. 소시지의 조직감은 피조개 첨가에 의해 낮아지는 경향을 보여 경도(Hardness), 탄력성(Springiness), 응집성(Cohesiveness), 검성(Gumminess), 깨짐성(Brittleness)에서 모두 PS가 높은 값을 나타냈다. 피조개 소시지의 조직감은 첨가된 부재료 종류에 따라 탄력성과 응집성에선 유의적인 차이를 나타내지 않았으나 대조구보다 조직감이 부드러워지고 기호도가 개선되는 것으로 나타났다. 피조개 첨가 유무에 따른 총 폴리페놀 함량과 ABTS radical 소거능에서 유의적인 차이를 보이지 않았으나, DPPH radical 소거능은 유의적인 차이를 나타내었다. 피조개 첨가구간의 총 폴리페놀 함량, DPPH radical 소거능, ABTS radical 소거능은 모두 녹차 처리구(GR1%, GR2%)에서 높은 값을 나타냈다. 피조개 소시지의 저장성 분석 결과, 소시지의 pH는 모든 처리구에서 저장 기간이 길어짐에 따라 낮아지는 경향을 나타냈다. VBN 함량은 7일차까지 20 mg/% 이하를 유지하였으나 14일차에서는 CS1, CS2, TM1, TM2, CT0에서 20 mg/% 이상을 나타내었으며 21일차에서는 모든 처리구에서 20 mg/% 이상의 수준을 보였다. 피조개 소시지 저장 시 저장기간이 길어짐에 따라 총균수가 증가하는 경향이 나타났으며 부재료 종류에 따른 총균수 억제 효과는 매우 미미한 것으로 확인되었다. 부재료를 첨가한 소시지 중에서 녹차 처리구(GR1%, GR2%)가 기능성 및 저장성 면에서 가장 우수한 것으로 나타났다. 본 연구 결과는 건강지향형 소시지 개발을 위한 피조개의 활용 가능성과 기능성 부재료를 이용한 품질 개선 효과를 보여주고 있으며 축산 가공품 개발을 위한 기초자료로 활용할 수 있을 것으로 사료된다.


Blood clam sausage (BCS) was prepared by substituting pork with blood clam (Scapharca broughtonii) and following functional ingredients: chitosan (1,4-β-linked 2-amino-2-deoxy-D-glucose, CS), green tea (Camellia sinensis L., GT) and turmeric (Curcuma longa L., TR). After heating at 85℃ for 135 min, antioxidative, textural and storage properties of sausage samples were investigated. BCS samples were higher in moisture content and redness of color than pork sausage (PS). All textural parameters (hardness, springiness, cohesiveness, gumminess, brittleness) of BCS showed much lower values than those of PS, indicating softening in texture of sausage by use of blood clam. Textural properties among BCS samples were significantly different depending on the kinds and the addition levels of functional ingredients (p < 0.05), but it was not remarkable. Total polyphenol content and DPPH radical scavenging activity were highest in BCS with GT, which corresponds to 742% and 1877% of those of PS. During storage at 15℃ for 21 d, pH of BCS decreased while volatile basic nitrogen (VBN) content and aerobic bacterial population of BCS increased. The VBN content was more than 20 mg/% in all sausage samples after 21 d of storage. GR-added BCR was higher in functionality and storage stability than the other BCR samples.

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4Antibacterial Activity of Chitooligosaccharides Derived from the Hydrolysis of Complex Consisting of Chitosan and Hyaluronic Acid

저자 : Suwan Kim , Min Sik Jeong , Sang Hun Jung , Yong Hyun Lee , Jae Kweon Park

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 3호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 118-126 (9 pages)

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The complex of chitosan and hyaluronic acid was treated with enzyme to obtain chitosan oligosaccharide designated to COS hereafter. The degree of decomposition was confirmed by reducing sugar quantitative method, and the molecular weight size was confirmed by Matrix Assisted Laser Desorption Ionization Time-of-Flight (MALDI-TOF) mass spectrometry analysis. Based on the fact that the substrate specificity of the enzyme is highly dependent on temperature, substrate concentration, and pH, etc, the COS obtained by treating a mixture of chitosan and hyaluronic acid, which physically mixes well, under the non-optimal reaction conditions of the chitosanase. Accordingly, it exhibited very significant antibacterial activity against Meticillin Resistant Stapylococcs aureus (MRSA). As a method for controlling molecular weight of COS, it was intended to propose a new enzyme usage as a study to identify the characteristics of the hydrolysates according to the reaction delay and enzyme activity through complex formation.

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5근적외선 레이저 반응성 광열-기포 생성 알지네이트 나노입자로부터 제어된 약물 방출

저자 : 김현지 ( Hyunji Kim ) , 김민아 ( Min Ah Kim ) , 이창문 ( Chang-moon Lee )

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 3호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 127-133 (7 pages)

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본 연구에서는 근적외선에 반응하는 알지네이트 기반 나노복합체를 제조하여 광열효과 및 버블생성으로 인한 약물 방출을 효과적으로 조절하고자 하였다. 제조된 AMP NPs의 평균 크기는 252.52 ± 0.39 nm로 측정되었고 구형의 형태를 나타내었다. 수용액 내에서의 침전이나 응집이 관찰되지 않았으며 7일 동안 사이즈의 큰 변화가 관찰되지 않았다. AMP NPs에 808 nm 레이저 조사 시 조사 시간 및 레이저 세기가 증가할수록 효과적인 온도 상승을 보였다. 생성된 열로 인해 PFH의 상전이를 유도하여 이에 따른 AMP NPs의 극적인 버블 생성을 초음파 영상으로 확인하였다. 약물 방출 평가에서 AMP NPs에 레이저 조사 시 약물 방출 속도를 향상시켰으며 반복적인 레이저 조사 시 순간적으로 약물의 방출이 증가하였다. 이러한 결과로부터, AMP NPs는 근적외선 반응성 약물 방출 조절제제로서의 가능성을 확인하였고, 이는 병변에서 테라노스틱 제제로 활용 될 수 있을 것으로 기대된다.


In order to maximize the therapeutic effect of a drug, it is necessary to control the release rate of the drug or efficiently deliver it to an accurate target site. In this study, alginate-melanin-methotrexate-perfluorohexane nanoparticles (AMP NPs) were proposed for controlling the drug release by near-infrared (NIR) laser-responsive photothermalbubbling effect. AMP NPs had a uniform spherical shape with a size of 252.52 ± 0.39 nm and did not show precipitation in PBS buffer for 7 days. Based on the unique light-to-heat conversion properties of melanin, the temperature of AMP NPs rose to about 52.9℃ after irradiation with an 808 nm NIR laser with an intensity of 1.5 W/㎠ for 10 min. As the exotherm of melanin reached the phase transition temperature of perfluorohexane (PFH), microbubbles from the AMP NPs solution were generated dramatically. The release rate of methotrexate from AMP NPs increased to 61% after 24 h of laser irradiation due to the heat generation of melanin and bubble generation of PFH in AMP NPs. From these results, it is expected that AMP NPs can be utilized as promising carriers for controlled drug release.

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6간세포에서 hydrogen peroxide 처리가 유도한 산화적 손상에 대한 참소라 육 가수분해물의 보호 효능 평가

저자 : 한의정 ( Eui Jeong Han ) , 안긴내 ( Ginnae Ahn ) , 신은지 ( Eun-ji Shin ) , 이영주 ( Young-ju Lee )

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 3호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 134-142 (9 pages)

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본 연구에서는 참소라 육으로부터 제조된 Alcalase 효소 가수분해물(BMA)의 항산화 효과와 간보호 효능 및 관련 기전을 규명하였다. BMA는 풍부한 타우린을 포함하고 있으며, H2O2가 처리된 hepatocytes에서 세포독성 없이 효과적으로 세포 내 ROS 생성량을 감소시킴으로써 효과적으로 세포를 보호하였다. 뿐만 아니라, BMA는 apoptosis 관련 인자의 발현량을 조절하고 MAPK과 NFκB 신호전달경로의 활성화를 효과적으로 억제함으로써 H2O2 처리에 의해 야기된 산화적 손상을 억제시켜 세포를 보호한다는 것을 확인할 수 있었다. 이상의 결과로부터, BMA는 산화적 손상에 의해 야기되는 간질환에 있어 부작용이 없는 천연 소재로서의 잠재적인 자원이 될 수 있음을 시사한다.


In this study, we investigated the protective effect of an Alcalase enzymatic hydrolysate derived from Batillus cornutus meat (BMA) against hydrogen peroxide (H2O2)-induced oxidative damages in hepatocytes. First, we confirmed that BMA containing plentiful taurine has the antioxidant activities by scavenging 2,2-azino-bis (3-ethylbenzthiazoline)- 6-sulfonic acid radical (ABTS + ) and increasing the reducing power and oxygen radical absorbance capacity (ORAC) value. Also, the treatment of BMA increased the cell viability by reducing the intracellular reactive oxygen species (ROS) production in H2O2-stimulated hepatocytes. In addition, BMA effectively decreased the sub-G1 DNA contents and the apoptotic body formation increased by H2O2 stimulation via modulating the protein expression levels of apoptotic molecules (Bcl-2, Bax and p53). Moreover, BMA suppressed the activation of extracellular signal-regulated kinase (ERK)/p38 and nuclear factor (NF)κB signaling by activating the nuclear factor erythroid 2-related factor 2 (Nrf2)/heme oxygenase-1 (HO-1) signaling known as antioxidant systems in H2O2-stimulated hepatocytes. These results suggest BMA protects hepatocytes against oxidative damages caused by H2O2 stimulation.

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1Biocontrol Potential of Cinnamon Bark Extracts and Chitosan Against Meloidogyne incognita Inflicted Disease in Black Pepper Plants

저자 : Dang-minh-chanh Nguyen , Thi-hoan Luong , Xuan-hoa Nguyen , Woo-jin Jung

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 2호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 45-52 (8 pages)

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In this study, we aimed to evaluate the nematicidal activity of cinnamon bark extracts (CE) and chitosan (Cs) against Meloidogyne incognita under in vitro, pot, and field conditions. In the pot experiments, CE mixed with Cs effectively inhibited M. incognita infection on black pepper plants. We applied the following formulations, which all significantly reduced the gall index and nematode number in 5 g of root and 100 g of soil: CE:Cs = 5 mg:20 mg, 10 mg:40 mg, and 15 mg:60 mg per pot. In addition, the application of CE:Cs = 32 mg:120 mg, 64 mg:240 mg, and 96 mg:360 mg per plant effectively reduced root gall formation and nematode density in black pepper roots and soil compared with that of the non-treated control under field conditions. Nematode density in the black pepper roots was positively correlated with the percentage of plants with yellow leaves. These results suggest that cinnamon mixed with chitosan may be used as an effective and eco-friendly pesticide against plant parasitic nematodes.

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2발효 해삼 및 흑삼 추출물의 산성다당체 분석 및 생리학적 특성

저자 : 손미례 ( Mi Yae Shon ) , 김영수 ( Yeong-su Kim )

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 2호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 53-62 (10 pages)

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발효 전 백삼, 홍삼, 흑삼의 열수추출물에서 산성다당체 함량은 백삼 15.0%, 홍삼 15.2%, 흑삼 17.3%로 분석되었으며 발효 공정을 통해서 백삼 18.2%, 홍삼 19.2%, 흑삼 21.3%로 증가하는 것으로 분석되었다. 따라서 발효를 통해 흑삼에서 최고 21~25%의 산성다당체 증가 효과를 볼 수 있었다. 해삼의 산성다당체는 균 접종량과 발효시간에 따라 26.14~74.21%의 범위로 측정되었으며 백국균(white-koji mould) 1% 첨가군에서 60시간 발효하였을 때 가장 높은 산성다당체 함량을 나타내었다. 백국균(white-koji mould)을 이용한 발효 흑삼에서는 Rg1, Rb1, Rb3 및 Re의 함량은 대부분 소실되었으며, 흑삼에서 검출되는 특유 ginsenoside Rg3, Rg5, Rk1 함량이 증가되는 것을 볼 수 있었다. 대식세포를 이용한 활성산소종 측정에서 발효 해삼, 흑삼 및 해삼복합소재 모두 활성산소종이 증가하지 않는 것을 확인할 수 있었으며 발효 해삼복합소재의 면역활성으로 인한 사이토카인(TNF-α, IL-6, IL-1β) 분비능이 발효 해삼 및 흑삼보다 높다는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 산화질소 관련 단백질 Cox-2 및 iNOS의 발현도 발효 해삼, 흑삼 및 해삼복합소재 모두 확인하였으며, 발효 해삼, 흑삼 및 해삼복합소재에서 Cox-2 및 iNOS의 발현이 가장 높은 것을 확인하였다. 이로 인해 발효 해삼복합소재는 발효 해삼 및 흑삼보다 면역 활성이 높아 산화질소 분비능도 높다는 것을 확인할 수 있었다. 발효 해삼복합소재로 인한 ERK1/2와 p38의 인산화가 발효 해삼 및 흑삼보다 높은 것이 관찰되었고 핵 내 NF-κB 발현이 MAPKs 결과와 유사하게 증가되는 것이 관찰되었으며, NF-κB 발현도 발효 해삼복합소재가 발효 해삼 및 흑삼보다 높은 것이 관찰되었다. 따라서 발효 해삼, 흑삼 및 해삼복합소재는 MAPKs의 인산화 및 NF-κB의 발현으로 인해 면역 활성을 유도하며, 그 중 발효 해삼복합소재가 가장 높은 면역 활성을 유도하는 것을 확인할 수 있었다. 발효 해삼, 흑삼 및 해삼복합소재 모두 CD80, CD86, MHC class I과 II의 발현이 증가하는 것이 관찰되었으며, 이전 결과와 유사하게 발효 해삼복합소재가 발효 해삼 및 흑삼보다 높게 발현되는 것이 관찰되었다. 이러한 결과로 보아 발효 해삼복합소재가 발효 해삼 및 흑삼보다 세포 표면 활성 인자 발현이 높아서 면역 활성이 높은 것을 확인할 수 있었다.

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3키토산의 세계시장 동향과 전망

저자 : 전율택 ( Yul Taek Jeon ) , 이민육 ( Min Yok Lee ) , 이호신 ( Ho Shin Lee ) , 이준우 ( Joon Woo Lee )

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 2호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 63-68 (6 pages)

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This study deals with chitosan market analysis which composed of demand forecasting. The global market for chitosan was estimated at USD 476.6 million in 2016, and is expected to reach USD 1,088.0 million by 2022 at a CAGR of 14.5% between 2017 and 2022. The chitosan market is dominated by the water treatment application. The market size in this application was USD 210.4 million in 2016 and is projected to register a CAGR of 14.0% between 2017 and 2022. The industrial grade was the largest segment of the chitosan market in 2016, accounting for a share of 52.0%. The global chitosan market is driven by the growing trend of using non-chemical products instead of chemical products. Though there are not many restraints in the chitosan market, there are regulations and compliances related to shrimp farming which affect the chitosan market growth. Hence, the researchers and manufacturers are required to research and develop ways to produce chitosan from non-aquatic sources.

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4Preservative Effect of Chitosan with 1,3-Butylene Glycol as Natural Preservative in Cosmetic Formulation

저자 : In Geun Jung , Guen Moo Lee , You Jin Hwang

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 2호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 69-75 (7 pages)

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This study was to evaluate the preservative effect of chitosan with 1,3-butylene glycol as natural preservative in cosmetic formulation. Antibacterial activity was measured by disc diffusion assay and broth microdilution assay were assessed on human skin microorganisms, Staphylococcus aureus, methicillin-resistant Staphylococcus aureus, and Escherichia coli. Antioxidant activity was measured by DPPH radical scavenging assay. Furthermore, an optimum formulation of chitosan with 1,3-butylene glycol was confirmed the preservative effect and cytotoxicity through challenge test and cell cytotoxicity assay. Chitosan showed remarkable antibacterial and antioxidant activities. A combination of chitosan with 1,3-butylene glycol exhibited higher activity compared to chitosan alone. Through results, the optimum formulation was determined to 156 μg/mL chitosan with 10% 1,3-butylene glycol (CTSN-BG). CTSN-BG showed a potent preservative effect and non-cytotoxicity on HaCaT and HEK 293 cells. In conclusion, the results demonstrated that CTSN-BG may be useful in a wide range of substitutes for chemical preservatives in cosmetic industry.

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5Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry Analysis for Molecular Characterization of Chitosan

저자 : Sang Hun Jung , Yong Hyun Lee , Dae Young Jeong , Yoo Ra Jeong , Byoung Ok Jung , Jae Kweon Park

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 2호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 76-82 (7 pages)

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Chitosan oligosaccharides designated to COS were derived from the hydrolysis of high molecular weight chitosan (HMWC). The range of molecular weight of COS was estimated to be approximately 0.5 to 2.5 kDa after the fractionation performed through gel-filtration, followed by MALDI-TOF mass spectrometry analysis. It was confirmed through the results that significant separation or fractionation was not observed well. Also, both dialyzed COS using a 12~14 kDa molecular weight cut-off (MWCO) membrane and salting-out COS were also showed no significant difference in the molecular weight of COS by MALDI-TOF mass spectrometry analysis. These results suggested that it is difficult to separate the chitosan hydrolysates bigger than 1 kDa according to the size (6-glucosamine) due to their high affinity between molecules which may tightly be associated together by hydrophobic or van der Waals force. Therefore, further examination on chitosan hydrolysis and fractionation for the production of COS with various sizes i.e., 7 or 8 units of glucosamine in large-scale, should be carefully considered for various applications.

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6초거대 다당류 사크란과 키토산을 이용한 하이드로겔의 합성 및 팽윤특성 분석

저자 : 신호준 ( Hojoon Shin ) , 권순영 ( Soon-young Kwon ) , 최동일 ( Dongil Choi )

발행기관 : 한국키틴키토산학회 간행물 : 한국키틴키토산학회지 26권 2호 발행 연도 : 2021 페이지 : pp. 83-89 (7 pages)

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본 연구에서는 사크란-키토산 하이드로겔을 성공적으로 합성하였으며 팽윤 특성을 분석하여 다음과 같은 결론을 얻었다.
(1) 사크란을 고분자인 키토산으로 가교함으로써 기존의 사크란 겔 이상의 높은 함수율을 획득할 수 있었다(98~99%).
(2) FT-IR, TGA, DSC, XRD 분석을 통해 사크란과 키토산 사이의 아마이드 결합에 의해 사크란-키토산 겔이 합성되었음을 확인하였다.
(3) 재팽윤시 블록 타입 하이드로겔은 필름 타입 하이드로겔 보다 빠른 팽윤과 더 높은 함수율 보였다. 염을 첨가하면 겔의 함수율이 감소하는 경향을 보였는데 염의 농도가 높을 수록 함수율 감소가 컸으며 필름 타입 하이드로겔에서 감소폭이 더 컸다. 이는 염에 의해 사크란의 나노 루프(nanoloop)가 해체되어 물분자의 포집능력이 감소하였으며, 2가 양이온이 복수의 COO-와 반응하여 가교효과를 발휘하여 재팽윤을 억제하였기 때문으로 사료된다.

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