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흡착과 용출을 이용한 적혈구 항체동정

서숙원
  • : 대한임상병리사협회
  • : 임상수혈검사학회 초록집 2020권1호
  • : 프로시딩
  • : 2020년 10월
  • : 44-44(1pages)

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자가항체가 있는 환자는 본인의 혈구뿐 만 아니라 검사용 패널 혈구에 모두 응집반응을 보이기 때문에 용혈성 수혈 부작용을 일으킬 수 있는 동종항체가 공존하더라도 검출하지 못 할 가능성이 있다. 특히 실온에서부터 37℃까지 반응하는 자가항체의 경우에는 혈액형 검사 시 혈구형과 혈청형 불일치의 원인이 되어 검사자에게 어려움을 유발할 수 있다. 따라서 정확한 혈액형 검사나 항체 동정을 위해서는 자가항체의 제거가 선행되어야 하며 자가항체를 제거하는 과정에서 가장 흔하게 사용되는 방법이 흡착과 용출이다. 혈청 중의 항체는 해당 항원이 있는 적혈구와 적당한 환경하에서 흡착될 수 있는데 여기에는 자가혈구를 사용하는 자가 흡착과 동종혈구를 사용하는 동종 흡착이 있다. 자가혈구 흡착은 자가항체와 동종항체가 공존할 경우 자가항체의 제거를 목적으로 하고 동종혈구 흡착은 혈청 내에 여러 가지 항체가 동시에 존재할 경우 각각의 특이성을 결정하고자 할 때 주로 사용하며, 항체 흡착 방법에는 ZZAP (a mixture of cysteine-activated proteolytic papain and dithiothreitol)법이나 polyethylene glycol (PEG)법 등이 있다. 용출은 적혈구에 있는 항원에 대해 특이하게 결합된 항체를 열이나 유기용매를 가하거나, pH를 변화시키는 방법 등을 이용하여 적혈구에서 항체를 해리하는 것으로 chloroquine법은 직접항글로불린 검사가 양성으로 혈액형 검사를 결정할 수 없는 경우 항체를 제거하고 적혈구 표현형 검사 시 유용하다. 과거에는 ether법이 가장 널리 쓰이는 방법이었지만 인체유해성 물질로 보관 및 사용에 주의를 요하고 검사 시간이 많이 소요되는 단점이 있어 최근에는 인체에 유해성이 적고 검사 시간이 단축되는 glycine acid EDTA법이 많이 이용되고 있다. 검사실에서 자가항체를 제거 시 ZZAP법을 이용한 많이 사용하고 있으나 과정이 복잡하고 시간이 많이 소요되며 Kell, M, N, S, Duffy 항원을 파괴되는 단점이 있다. 혈청희석법은 검사 과정이 간단하고 신속하지만, 단순히 혈청의 희석에만 의존하므로 자가항체가 동종항체보다 역가가 높은 경우에는 정확한 동정이 불가능하고, ZZAP법에 비해 임상적으로 유의한 동종항체 검출율이 낮다는 보고가 있다. PEG법은 검사 과정이 ZZAP법에 비해 간단하고 항체 동정 검출율이 더 좋은 것으로 알려져 있어 본원에서는 PEG법을 이용한 방법을 주로 사용하고 있다. 하지만 PEG법을 이용한 자가항체 흡착제거는 최근 3개월 이내에 수혈력이 있는 경우 사용할 수 없으며, 이 경우에는 동종혈구 흡착법을 사용해야 한다. 그러므로 자가항체와 동종항체가 공존하는 경우에는 반드시 수혈력을 확인 후 PEG법, ZZAP법, 혈청희석법 등을 사용하는 것이 바람직할 것으로 사료된다.

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간행물정보

  • : 의약학분야  > 기타(의약학)
  • :
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  • : 연간
  • :
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  • : 학술지
  • : 프로시딩
  • : 1990-2020
  • : 393


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1흡착과 용출을 이용한 적혈구 항체동정

저자 : 서숙원

발행기관 : 대한임상병리사협회 간행물 : 임상수혈검사학회 초록집 2020권 1호 발행 연도 : 2020 페이지 : pp. 44-44 (1 pages)

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자가항체가 있는 환자는 본인의 혈구뿐 만 아니라 검사용 패널 혈구에 모두 응집반응을 보이기 때문에 용혈성 수혈 부작용을 일으킬 수 있는 동종항체가 공존하더라도 검출하지 못 할 가능성이 있다. 특히 실온에서부터 37℃까지 반응하는 자가항체의 경우에는 혈액형 검사 시 혈구형과 혈청형 불일치의 원인이 되어 검사자에게 어려움을 유발할 수 있다. 따라서 정확한 혈액형 검사나 항체 동정을 위해서는 자가항체의 제거가 선행되어야 하며 자가항체를 제거하는 과정에서 가장 흔하게 사용되는 방법이 흡착과 용출이다. 혈청 중의 항체는 해당 항원이 있는 적혈구와 적당한 환경하에서 흡착될 수 있는데 여기에는 자가혈구를 사용하는 자가 흡착과 동종혈구를 사용하는 동종 흡착이 있다. 자가혈구 흡착은 자가항체와 동종항체가 공존할 경우 자가항체의 제거를 목적으로 하고 동종혈구 흡착은 혈청 내에 여러 가지 항체가 동시에 존재할 경우 각각의 특이성을 결정하고자 할 때 주로 사용하며, 항체 흡착 방법에는 ZZAP (a mixture of cysteine-activated proteolytic papain and dithiothreitol)법이나 polyethylene glycol (PEG)법 등이 있다. 용출은 적혈구에 있는 항원에 대해 특이하게 결합된 항체를 열이나 유기용매를 가하거나, pH를 변화시키는 방법 등을 이용하여 적혈구에서 항체를 해리하는 것으로 chloroquine법은 직접항글로불린 검사가 양성으로 혈액형 검사를 결정할 수 없는 경우 항체를 제거하고 적혈구 표현형 검사 시 유용하다. 과거에는 ether법이 가장 널리 쓰이는 방법이었지만 인체유해성 물질로 보관 및 사용에 주의를 요하고 검사 시간이 많이 소요되는 단점이 있어 최근에는 인체에 유해성이 적고 검사 시간이 단축되는 glycine acid EDTA법이 많이 이용되고 있다. 검사실에서 자가항체를 제거 시 ZZAP법을 이용한 많이 사용하고 있으나 과정이 복잡하고 시간이 많이 소요되며 Kell, M, N, S, Duffy 항원을 파괴되는 단점이 있다. 혈청희석법은 검사 과정이 간단하고 신속하지만, 단순히 혈청의 희석에만 의존하므로 자가항체가 동종항체보다 역가가 높은 경우에는 정확한 동정이 불가능하고, ZZAP법에 비해 임상적으로 유의한 동종항체 검출율이 낮다는 보고가 있다. PEG법은 검사 과정이 ZZAP법에 비해 간단하고 항체 동정 검출율이 더 좋은 것으로 알려져 있어 본원에서는 PEG법을 이용한 방법을 주로 사용하고 있다. 하지만 PEG법을 이용한 자가항체 흡착제거는 최근 3개월 이내에 수혈력이 있는 경우 사용할 수 없으며, 이 경우에는 동종혈구 흡착법을 사용해야 한다. 그러므로 자가항체와 동종항체가 공존하는 경우에는 반드시 수혈력을 확인 후 PEG법, ZZAP법, 혈청희석법 등을 사용하는 것이 바람직할 것으로 사료된다.

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