18.97.14.85
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Candida sp . BT001 의 Xylose Reductase 의 정제 및 성질
황인균 , 이상협 , 방원기
UCI I410-ECN-0102-2008-520-000742806
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D-xylose의 통성 발효성 효모, Candida sp. BT001로 부터 D-xylose를 xylitol로의 전환을 촉매하는 효소, xylose reductase[EC 1.1.1.21]를 ammonium sulfate fractionation, DEAE-A5O ion exchange chromatography. Sephacryl S-200 gel filtration, 그리고 Affi-gel Blue affinity chromatography에 의해 정제하여 그 성질을 조사하였다. 정제된 xylose reductase의 분자량은 SDS-PAGE상에서 31,000으로, 그리고 gel filtration상에서 61,000으로, 2개의 subunit로 구성된 효소임을 추정하였다. 정제된 xylose reductase는 보효소 NADPH 및 NADH에 모두 특이성을 나타내었으며, 또한 각각의 보효소에 대해 활성을 지니는 효소는 따로 분리되지 않았다. Specific activity는 NADPH에 대해 11.78U/mg, NADH에 대해 6.01U/mg이었으며, 따라서 NADH/NADPH의 활성비는 0.51이었다. 정제된 xylose reductase의 D-xylose와 NADPH 및 NADH에 대한 Km값은 각각 94.2×10^(-3)M, 0.011×10^(-3)M 및 0.032×10^(-3)M 이었다. Aldose들에 대한 활성은 L-arabinose, D-xylose 순으로 높았다. 최적 효소 반응의 pH 및 반응 온도는 각각 6.2와 40℃이었으며, 이 효소는 30℃에서 20분간 안정하였다.

[자료제공 : 네이버학술정보]
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