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1992년도 임시총회 및 제62차 학술발표회 진행순서 및 발표논문초록 ( Program and Abstracts of the Annual Meeting of the Korean Agricultural Chemical Society ) ; Flavobacterium meningosepticum T - 2799 가 생산하는 nucleoside oxidase 와 peroxidase 에 관한 연구
최양문
UCI I410-ECN-0102-2008-520-000738300
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Nucleoside의 대사경로는 nucleoside phosphorylase에 의한 phosphorylation 분해 경로를 포함하여 nucleoside에 작용하는 효소에 관한 연구는 많았지만 nucleoside의 산화에 대한 연구는 거의 보고된 바 없었다. 최근에 이르러 Isono 등이 Pseudomonas maltophilia로부터 분리 정제하여 그 효소학적 성질과 효소의 응용성에 관하여 보고하였다. 이들이 보고한 nucleoside oxidase의 stoichiometry는 1 mole의 nucleoside와 1 mole의 산소로 부터 H₂O₂의 생성없이 1 mole의 nucleoside 5`-carboxylic acid를 생성함을 밝혔다. 본 연구에서는 Pseudomonas maltophilia의 nucleoside oxidase와는 다른 stoichiometry를 갖는 nucleoside oxidase 즉, nucleoside의 5`위치의 CH₂OH를 carboxylic acid로 산화시 H₂O₂를 생성하는 새로운 종류의 효소를 토양에서 분리된 Flavobacterium meningosepticum-2799로부터 발견하였으며, 또한 Flavobacterium meningosepticum T-2799로부터 nucleoside oxidase 생산조건을 검토 중 hydrogen peroxidase가 nucleoside oxidise의 생산에 비례하여 생산되어지는 것을 발견하고 이 두 효소를 정제하여 효소학적 성질을 검토하였다. Nucleoside oxidase는 분자량이 480,000이였으며, subunit는 SDS-PAGE에 의해 81,000, 69,000, 32,000과 16,000이였다. Visible absorption spectra 결과로 본 효소는 hemoprotein이며, enzymatic method에 의해 1 mole의 nucleoside oxidise는 3 mole의 FAD를 포함하고 있는 hemoflavoprotein으로 확인되었다. 본 효소는 adenosine, inosine, thymidine, uridine, cytidine과 같은 nucleoside는 산화시켰으나, nucleotide와 ribose는 전혀 산화시키지 못하였다. Flavobacterium meningosepticum T-2799가 생산한 peroxidase는 분자량이 220,000이였으며, subunit는 분자량이 54,000으로 동일한 크기의 4개로 구성되어진 것으로 사료되어 현재까지 알려진 다른 기원의 peroxidase에 비해 분자량이 크며, subunit수가 많았다. 본 효소의 visible absorption spectra는 410, 500 및 630nm에서 최대흡수를, 환원형에서는 435와 500nm에서 최대 흡수를 나타내어, 다른 기원의 peroxidase와 마찬가지로 hemoprotein으로 관찰되었으며, 등전점은 4.1이었다. 본 효소의 기질특이성은 phenol, 2,4-dichlorophenol, N,N-diethylaniline, guaiacol, N-ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfop-ropyl)-m-toluidine, 2,2`-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) 등의 검토된 모든 수소공여체에서 활성을 나타냈다. 이러한 폭 넓은 기질특이성은 horseradish의 peroxidase를 대체하여 임상진단시약으로 사용할 수 있음을 나타내고 있다.

[자료제공 : 네이버학술정보]
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