전통적인 발효식초로부터 산 생성능이 높은 유산균을 분리하여 생화학적 특성과 16S rRNA 염기서열 분석을 거쳐 신규의 L. harbinensis VF (KACC 92345P)를 분리·동정하였다. 본 연구에서는 분리된 L. harbinensis VF에 대하여 내산성, 내담즙성, 용혈성, 항생물질에 대한 내성, 항균활성, 소수성과 aggregation에 해당하는 프로바이오틱스 특성을 평가하였다. 분리된 L. harbinensis VF는 pH 2.0과 2.5에 3시간 노출되어도 생존율이 각각 68.9%와 95.6%이었으며 0.3% 및 0.5% 담즙산에서 3시간 노출되어도 생존율이 각각 91.8% 및 83.6%로 기존에 보고된 L. harbinensis에 비하여 높은 내산성과 내담즙성을 지니고 있었다. 또한 γ-hemolysis로 확인되어 용혈성에 대한 안전성도 확보되었다. 분리된 L. harbinensis VF는 trimethoprim/sulfamethoxazole를 제외한 12종의 항생물질에 대한 내성을 지니고 있으며 대조구로 사용한 L. plantarum (KCTC 3108)과 기존에 보고된 L. harbinensis보다 항생물질에 대하여 광범위한 내성을 지니고 있었다. 분리된 L. harbinensis VF는 S. aureus를 제외한 B. cereus, E. coli O157:H7, L. monocytogenes, S. typhimurium, 4종의 식중독 유발 위해미생물에 대한 항균활성이 확인되었으며 이러한 항균활성은 배양액에 존재하는 유기산에 기인하는 것으로 확인되었다. 분리된 L. harbinensis VF에 대하여 xylene과 chloroform을 이용하여 측정한 hydrophobicity는 1시간 반응한 이후 각각 11.7% 및 14.4%로 대조구인 L. plantarum (44.8% & 57.7%)에 비하여 낮은 소수성을 지니고 있었다. 분리된 L. harbinensis VF의 auto-aggregation 능력은 24시간 이후에 83.8%로 대조구인 L. plantarum (64.0%)보다 높았으며 위해미생물과의 co-aggregation은 B. cereus ( 87.6 %), S. aureus (74.1%), L. monocytogenes (70.5%), E. coli (67.6%), S. typhimurium (49.2%) 순이었으며 대조구인 L. plantarum보다 높은 경향이 확인되었다. 본 연구결과로부터 발효식초로부터 분리한 L. harbinensis VF는 프로바이오틱스 균주로서 활용 가능성이 높을 것으로 판단된다.

A novel L. harbinensis VF was isolated from fermented vinegar and identified through biochemical characteristics and 16S rRNA sequencing analysis. Characteristics of probiotics were studied for acid and bile salt tolerances, hemolytic activity, antibiotic resistance, antimicrobial activity, cell surface hydrophobicity, and aggregation. The survival rates of the isolate were maintained at 68.9% and 95.6% after 3 h incubation at pH 2.0 and 2.5 and were over 74% at bile salt concentrations of 0.3% and 0.5%. The hemolytic activity was confirmed to be γ-hemolysis. The isolate showed broad antibiotics-resistance in over 12 antibiotics except for trimethoprim/sulfamethoxazole, compared to L. plantarum (KCTC 3108), used as control, and previously reported L. harbinensis. Antimicrobial activity was confirmed against pathogens, B. cereus, E. coli O157:H7, L. monocytogenes, and S. typhimurium, except S. aureus, and it was attributed to produced organic acids (low pH). The hydrophobicity for xylene and chloroform were 16.7% and 20.4%, respectively, lower than those of L. plantarum (41.2% & 49.9%). The auto-aggregation and co-aggregation with pathogens were 83.8% and 49.2-87.6% at 24 h incubation, respectively, higher than those of L. plantarum. From this study, L. harbinensis VF is likely to be used as a probiotic strain and is a strong candidate for commercial application.