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탈회방법에 따른 H&E 염색성 비교 평가
홍석준 , 이영민 , 김경신 , 김은숙 , 홍순동
UCI I410-ECN-0102-2017-510-000585848
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탈회는 조직검사의 대상중에는 뼈의 일부,석회화된 병소 등에 칼슘을 포함하는 조직이 있을 때 시행한다. 이에 본원에서는 뼈조직 (femoral head)를 여러 가지 탈회 용액으로 탈회를 실시하여 최적의 탈회조건을 선택하여 최적의 H&E slide를 제작하고자 본 실험을 시행하였다. 탈회하기 전에 조직을 5mm이하로 절단하고 NBF 고정하고 수세하여 본원에서 주로 사용하고 있는 5% Nitric acid와 다른 4가지 탈회용액을 선택했다. 탈회용액은 다음과 같다. 1. 5% Nitric aicd 용액 ( nitric acid원액-5ml, 증류수-95ml) 2. 5% Nitric-alcohol 용액 ( nitric acid원액-5ml, 80% ethyl alcohol-95ml) 3. Formal nitric acid 용액 (Nitric acid원액-10ml, Formalin conc-5ml., 증류수- 85ml) 4. Plank-Rychlo`s용액 (Ammonium chloride-7g, .Hydrochroric acid-8.5ml, formic acid-5ml, 증류 수-82.5ml) 5. Trischloroacetic acid 용액 (Trischloroacetic acid-10ml, 증류수-90ml) 뼈조직을 1.0xl.0x0.5cm으로 절단하여 위 5가지 용액으로 탈회를 시행하였다. 조직 표본을 만 드는데 탈회용액의 용량,온도 및 기타 조건은 동일하게 하였다. 모든 조직은 각각의 탈회 용액에 6시간, 12시간, 24시간, 48시간을 두고 탈회를 실시한다. 그리 고 조직을 박절하고 탈 파라핀 과정을 거친 후 H&E 염색 전에 5% Sodium bicarbonate에 30분 간 보정을 실시하여 과침투된 add를 제거하였다. 시간대 별로 탈회된 각 조직의 H&E 시간은 동일하게 주었다. 위와 같이 5가지 탈회 용액을 비교하여 세포 충실도 및 조직구조의 보존 과 염색성을 비교하였다.

[자료제공 : 네이버학술정보]
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