BRCA1 유전자는 유전성 유방암/난소암에서 종양억제유전자로서 중요한 역할을 하는 것으로 밝혀지고 있으나 그 생화학적 성상이나 기능에 관해서는 아직 정확히 알려져 있지 않다. 또한 비유전성 유방암과 난소암에서도 BRCA1 유전자의 변화가 중요한 역할을 하리라고 추론되고 있고 비유전성 유방암에서는 이에 관한 연구 결과가 보고되고 있으나 아직 정확히 알려져 있지 않으며 특히 비유전성 난소암 조직에서는 연구된 바가 없다. 이에 본 연구자는 유전성 유방암/난소암에서뿐만 아 니라 비유전성 유방암, 난소암에서 암의 발생에 중요한 역할을 할 것으로 추정되고 있는 BRCA1 유전자의 전사 산물의 발현 및 그 생성 단백의 발현을 정상 난소 조직 과 비유전성 난소암 조직에서 비교 분석하여 비유전성 난소암 발생에서 BRCA1 유전자의 역할을 규명하고자 nothern blot, RT-PCR 및 in situ hybridization을 이용하여 정상 난소조직과 난소암 조직에서 BRCA1 유전자의 전 사 양상을 비교하고 western blot과 면역화학조직법을 이 용하여 정상 난소조직과 난소암 조직에서 BRCA1 단백 산물의 발현 양상과 세포수준에서의 발현 위치를 비교 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. BRCA1 유전자는 성인과 태아의 다양한 장기에 분포 하며 정상 난소조직에서는 약하게 발현되었다. Northern blot 결과에 의하면 난소암과 유방암 세포주에서는 7.8 kb 의 정상형 BRCA1 mRNA와 엑손 11이 분절된 4.3 kb의 변이형이 같이 발현되었다. 이러한 결과를 확인하기 위하 여 RT-PCR을 이용하여 정상 난소조직과 난소암 조직에 서 BRCA1 유전자의 전사 정도를 비교 검색한 결과 정상 난소조직에서는 모두 BRCA1 유전자의 발현을 보였으나 난소암 조직 8예 중 3예(37.5%)에서는 BRCA1 엑손 11 부 위가 분절된 형태가 전사됨을 확인하였다. 이러한 결과는 in situ hybridization에서도 난소암 조직에서 BRCA1의 비 정상적으로 발현됨으로써 검증되었다. Western blot을 이 용하여 BRCA1 단백 산물을 검색한 결과 220 kD의 정상 형 BRCA1 단백 산물이 발현되었으며 난소암 조직 10예 중 4예(40%)에서 BRCA1 엑손 11이 분절된 87 kD의 단백 산물이 정상 난소조직에 비해 증가되어 발현되었으나 통 계학적으로 유의하지는 않았다. 면역조직화학법을 이용 하여 BRCA1 단백 산물의 세포수준내 발현 위치를 확인 한 결과 유방과 난소 상피세포에서는 핵내에서 BRCA1 단백 산물이 발현되나 난소암 조직 16예 중 7예(44%)에서 는 BRCA1 단백 산물이 주로 세포질에서 발현되며 핵내 에서도 일부 발현되는 양상을 보였다. 이상의 결과로 비유전성 난소암의 일부에서 BRCA1 유전자의 엑손 11이 분절된 형태로 발현되며 이러한 변 이된 BRCA1 유전자가 정상적인 기능을 소실함으로써 비유전성 난소암의 발생에도 BRCA1 유전자가 관여하리 라는 가설을 지지하는 소견을 얻었다. 이 연구는 비유전 성 난소암에서 BRCA1 유전자 치료 방법을 개발하는 근 간이 되리라고 사료되며 향후 더 많은 대상을 포함하여 동일한 대상 조직에서 BRCA1 유전자의 발현을 비교분 석하는 연구가 필요할 것으로 사료된다.

Recently the breast cancer susceptibility (BRCA1) gene on chromosome 17q has been isolated and identified as a tumor supressor gene that is mutated in many cases of inherited breast and ovarian cancer. Most of these mutations result in truncation and presumed inactivation of the BRCA1 protein. Many sporadic breast and ovarian cancers show LOH of chromosome 17q markers and it was assumed that BRCA1 would be also important in sporadic cancers. However, the function and the role of BRCA1 gene has not been elucidated, especially in sporadic ovarian cancers. In order to elucidate the role of BRCA1 in carcinogenesis of sporadic ovarian cancer, transcripts for BRCA1 gene were analysed in normal ovary tissues and sporadic ovarian cancer tissues using northern blot, RT-PCR, and in situ hybridization. Localization of BRCA1 protein in normal ovarian tissues and ovarian cancer tissues was determined by immunohistochemistry using BRCA1 Ab (K18). The pattern and level of BRCA1 protein was analysed by western blotting using BRCA1 Ab (6B4). By northern blot analysis, a 7.8 kb BRCA1 transcript was identified in various normal adult and fetal tissues. However,7.8 kb and 4.3 kb BRCA1 transcripts were detected in breast and ovarian cancer cell lines. The exon 11 truncated form of BRCA1 was detected in 3 of 8 (37.5%) ovarian cancer tissues by RT-PCR analysis and confirmed by in situ hybridization. In western blot analysis, BRCA1 protein was identified as a 220 kD protein and 87 kD of truncated protein product in normal ovary tissues and ovarian cancer tissues, however 87 kD of truncated protein product was strongly expressed in 4 of 10 (40%) ovarian cancer tissues. BRCA1 protein was localized in nucleus of normal breast epithelium and benign ovarian tumor epithelium and mainly in cytoplasm in 7 of 16 (44%) ovarian cancer tissues by immunohistochemistry. In conclusion, these findings suggest that the mutated BRCA1 gene (truncation of exon 11) may be involved in the carcinogenesis of sporadic ovarian cancers.