비활성 형태인 recombinant 72-kDa MMP-2를 분비하는 MCF-7MMP-2 세포주와 난소암 세포주인 CAOV- 4, SW626, NIH: OVCAR-3, SK-OV-3를 이용하여 MMP-2의 분비 능력과 활성화 양상을 in vitro에서의 난소암 세포의 침윤 능력과 비교 연구하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 난소암 세포주들은 모두 비활성형 MMP-2를 분 비하였으나 NIH: OVCAR-3, SK-OV-3, SW626 세포 주에서는 활성형 MMP-2를 보였다. 2. Boyden chamber를 이용한 세포주들의 침윤 능 력 검사에서 SK-OV-3, NIH: OVCAR-3, SW626, 그리 고 CAOV-4 세포주의 순으로 침윤 능력을 보였고 이 는 활성형 62kDa의 MMP-2 소견과 일치하였다. 3. Matrigel을 이용한 세포주들의 성장검사에서 NIH: OVCAR-3, SK-OV-3 세포주들은 SW626, CAOV- 4 세포주들보다 수지상 돌기를 만드는 정도가 심하였 으며 세포들의 분포 양상은 집단화를 보였다. 4. MMP-2의 활성물질인 Concanavalin A를 CAOV- 4 세포주 배양액에 투여하여 활성형 MMP-2가 생산 됨이 확인되었다. 5. Cycloheximide를 SK-OV-3, NIH: OVCAR-3 및 SW626 세포주에 투여하여 MMP-2의 생산 및 분비가 억제되는 것을 확인하였다. 이상의 결과에서 난소암 세포주들의 침윤과 전이 에는 MMP-2가 직접적으로 관여함이 밝혀졌다. 특히 MMP-2의 활성화 정도와 in vitro 침윤 능력은 밀접 한 관계에 있으며 특히 난소암 세포주들에 의해 분 비되는 MMP-2는 효소 조절물질에 의해서 활성 및 억제될 수 있음을 확인함으로서 향후 이러한 효소 조절물질을 이용하여 난소암의 전이 예방과 치료에 응용할 수 있게 될 것이다.

Our purpose in this study was to detect the secretory pattern and the degree of enzymatic activity of MMP-2 and to evaluate the invasive activty in vitro in each cancer cell line, using four kinds of human ovarian cancer cell lines (CAOV-4, SW626, NIH: OVCAR-3, and SK-OV-3) as well as MCF-7MMP-2 cell line which secretes recombinant 72-kDa MMP-2 as an inactive form. The results were as follows; 1. An inactive form of MMP-2 was secreted by all ovarian cancer cell lines, but the activated form of MMP-2 was also secreted by NIH: OVCAR-3, SK-OV-3, and SW626. 2. In the Boyden chamber chemoinvasion assay, the invasive activity was shown in SK-OV-3, NIH: OVCAR-3, SW626, and CAOV-4 cell lines in order. This finding corresponds with the secretory pattern of 62 kDa MMP-2, activated form. 3. In the outgrowth morphology on Matrigel, the dendritic processes of NIH: OVCAR-3 and SK-OV-3 cell lines were seen to emerge more actively than those of SW626 and CAOV-4 cell lines. NIH: OVCAR-3 and SK-OV-3 cell lines also had a clustered formation. 4. An inactive form of MMP-2 secreted by CAOV-4 was activated by the treatment with Concanavalin A, MMP-2 activator. 5. The productions and secretions of MMP-2 in SK-OV-3, NIH: OVCAR-3, and SW626 cell lines were inhibited by the treatment with cycloheximide, MMP-2 inhibitor. From the above results, we showed that the invasion and metastasis of human ovarian cancr cell lines have directly relations with MMP-2. It was identified that the secretory patterns of activated MMP-2 were closely associated with the invasiul activity of human ovarian cancer cell lines in vitro and that the MMP-2 secreted by human ovarian cancer cell lines might been activated or inhibited by enzyme regulators. In the future, we wish this study applied to the metastatic prevention and treatment of human ovarian cancer by using enzyme regulators.