산전유전검사를 받을 임산부 22예를 대상으로 이들의 말초혈액을 채취하여 Y chromosome-specific ZFY gene DNA sequence와 Y chromosome 단완의 DYS 14 locus에 위치한 Y-specific sequence를 nested polymerase chain reaction assay법으로 증폭하여 산전 태아 성(fetal sex)판정을 시도하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. ZFY 유전자의 primer인 Z1, Z2 및 Z3, Z4를 이용한 중합효소연쇄반응 결과, 여아 및 남아를 임신한 전예에서 양성띠가 나타나 비특이성을 보였다. 2. Y-chromosome DYS 14 locus의 sequence primer인 Y1.5, Y1.6 및 Y1.7, Y1.8 primer를 이용한 중합효소연쇄반응 결과, sensitivity는 76.9%, specificity는 55.5%였으며, positive 및 negative predictive value는 각각 71.4%와 62.5%였다. 이를 임신주수별로 분석하여 보면 임신 초기, 중기 및 말기의 positive predictive value는 각각 66.6%, 66.6%와 80%로, negative predictive value는 각각 50%, 50% 및 100%로 나타났으며, 임신 9-16주에는 여아를 임신한 임산부 중 남성 특이의 band가 나타나는 경우가 6예중 3예, 남아를 임신한 임산부 중 남성특이의 band가 나타나지 않는 경우가 7예중 3예로 낮은 신회도를 보였으나 임신 18-40주에는 남아인 경우 1예를 제외하고는 남성 특이 band가 나타났으며, 여아인 경우는 모든 예에서 198 base pair의 남성 특이 band가 나타나지 않았다. 저자들은 본 연구에서 모체 말초혈액에서 중합효소연쇄반응(PCR)을 이용한 태아의 성판정은 임신후기에는 가능하나 임신초기에 있어서는 그 신뢰도가 낮은 것으로 생각 된다. 따라서, 임신 초기 모체혈액내에 있는 태아세포만을 선별적으로 구별할 수 있는 방법을 이용하여 Y1.5, Y1.6 및 Y1.7, Y1.8 primer를 이용 PCR을 하면 정확한 태아의 성판정이 가능할 것으로 사료된다. 본 연구는 연세대학교 의과대학 교수연구비에 의해서 이루어짐 (1994년도).

Objectives : Detection of Y-chromosome specific gene in the maternal circulation has clinical importance because of its potential usefulness in determining fetal sex in mothers with severe X-linked disorders such as classic hemophilia A and Duchenne`s muscular dystrophy. Numerous attempts have been made to identify Y specific gene in bloods of mothers bearing male fetuses, however, the results have been controversial. Therefore, we have investigated the use of a nested polymerase chain reaction assay for the detection of a fetal specific Y-chromosome sequence. Methods : Y chromosome specific ZFY gene DNA sequence(using Z1, Z2 and Z3, Z4 primers) and Y chromosome sequence in DYS 14 locus (using Y1.5, Y1.6 and Y1.7, Y1.8 primers) have been identified by an in vitro enzymatic deoxyribonucleic acid amplification method in peripheral blood specimens of 22 pregnant women with gestational ages of 9 to 40 weeks. Results : All women bearing male or female baby were positive for the ZFY gene. Thirteen fetuses were confirmed as males by amniocentesis or chorionic villi sampling, and 10 of these were positive for the Y chromosome specific sequence in DYS 14 locus using Y1.5, Y1.6 and Y1.7, Y1.8 primers(sensitivity 76.9%), however, 4 of the 9 cases diagnosed as females were also positive(specificity 55.5%). Positive and negative predictive values were 71.4% and 62.5%. In terms of the gestational age, positive predictive values of 66.6%, 66.6% and 80% were obtained for the first, second and third trimesters, respectively. The corresponding negative predictive values are 50%, 50%, and 100%, respectively. Conclusion : Fetal sex determination by PCR employing maternal peripheral blood is usually possible in late pregnancy. It is less reliable in early pregnancy. It appears that using a method separating fetal cells from maternal blood and then by running PCR on these cells with Y1.5, Y1.6 and Y1.7, Y1.8 primers could make a fairly accurate fetal sex determination.