본 연구는 유전자내 탐침(intragenic marker)인 BclI-intron 18, XbaI-intron 22 및 유전자외 탐침 (extragenic marker) 인 St14 VNTR을 이용하여 중합효소연쇄반응(PCR)법으로 4가계에서 혈우병 A 보인자 진단과 산전 태아진단을 시도하여 다음의 결론을 얻었다. A, B가계 태아의 판정은 융모막 융모(villi)를 PCR 분석하여 남아임이 확인되었다. 1. A 가계는 XbaI을 이용하였는데 큰아들이 혈우병 A로 XbaI 처리시 68bp에서 양성띠를 나타내었고 산모와 할머니는 96bp외 68bp 모두 다 양성띠를 나타내어 68b(+)인 보인자이며, 태아(융모막 융모)는 96bp에서 양성띠를 나타내어 정상임을 알 수 있었다. 이 가계는 BclI 처리시는 informative 하지 못하였다. 2. B가계는 아들이 혈우병이 A로 사망한 가계로 St 14 VNTR을 이용하였는바, 정상인 아들은 1280bp St 14 VNTR 대립유전자에서 양성띠를 나타내었고 산모는 1280 bp/700bp 할머니는 1470 bp/700 bp 대립유전자에서 각각 양성띠를 나타내어 700bp 대립유전자가 혈우병 A 이환과 관련된 것임을 알 수 있다. 따라서 태아 (융모막 융모)는 1280bp 대립유전자에서 양성띠를 나타내 정상아임을 알 수 있다. 3. C 가계는 St 14 VNTR을 이용하여 딸의 보인자 여부를 진단한 예로, 아들은 혈우병 A환자로 1390 bp St 14 VNTR 대립유전자에 양성띠를 나타내었고 어머니는 1390 bp/ 1330 bp, 아버지는 700bp에서 양성띠를 보였다. 딸은 1330bp/ 700bp에서 양성띠를 나타내어 양부모의 정상 대립 유전자 즉, 1330bp 와 700bp를 받아 정상임을 알 수 있었다. 4. D 가계는 혈우병 A 아들은 1280 bp St 14 VNTR 대립유전자에 양성띠를 나타내었고 어머니, 할머니는 1280 bp/700 bp, 아버지는 1390bp 대립유전자 양성띠를 나타내어, 1280pb 대립유전자가 병의 이환과 관련되어 있음을 알 수 있다. 딸(피검자)은 1390bp/700bp 로 보인자가 아님을 알 수 있다. 이상의 연구결과로 intragenic marker (BclI-intron 18, XbaI-intron 22)와 extragenic marker (St 14 VNTR )를 이용한 중합효소 연쇄반응(PCR)법은 혈우병 A의 보인자 및 산전태아 진단에 상당히 유용하며, 획기적인 방법으로서 임신초기에 가능하며, 앞으로 착상전 유전진단에도 이용될 것으로 사료된다.

Objectives : In this study, polymerase chain reaction (PCR) was used to determine the status of hemophilia A gene carriage in women from hemophilia A family and to evaluate the efficacy of PCR in prental genetic diagnosis of hemophilia A. Methods : Fetal sex determination from chorionic villi was carreid out by PCR using Y-chromosome specifc sequence(Y-1, Y-2), PCR was also run to identify intragenic RFLPs(BclI and XbaI) and extragenic marker (St14 VNTR) from the bloods of hemophilia A family (4 cases) to detect female carriers and establish prenatal diagnosis. Results : Fetal sex in the families A and B studied were both males, based on the presence of Y-chromosome specific band. In the family A, the BclI site was present in the fetuses and family members tested, thus, this site was noninformative. However, in this family, heterozygosity of the fetus, being tested was demonstrated using XbaI as thus normal. In the family B, using BclI and XbaI were noninformative, however, the subsequent use of an extragenic marker (St 14 VNTR) extablished normal Phenotype of fetus. In the families C and D, using St14 VNTR it was determined that the two daughters did not inherit the mutation. Conclusions : Carrier detection and fetal diagnosis of hemophilia A through PCR is useful, innovative, and accurate, whice can be done within a few hours and possible in early pregnancy.