FSH와 hMG를 사용하여 체외수정시술을 위한 난소의 과배란유도를 실시한 후 질식으로 채취된 난자를 대상으로 하여 기존의 난자 성숙도 판정 방법보다 더욱 정확한 난자 성숙도 판정을 가능하게 하고 배란직전 난자의 성숙도와 난구-관상세포 복합체의 형태학적 성숙도 사이의 상관관계를 평가하고자 하이알루로니다제로 처리하여 난구-관상세포복합체를 난자로부터 분리 분산 시킨 후 난자의 성숙도를 관찰하고 난구-관상세포 복합체의 제거가 인간 난자의 체외수정과 수정란의 난할 등 발달에 미치는 영향을 연구하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 총 248개의 난자 중 난자 채취 직후 기존의 microdroplet 방법으로 난구-관상세포 복합체의 형태학적 성숙도를 판정한 결과 성숙 난자가 113개(45.6%), 중등도 성숙 난자가 115개(46.4%), 미성숙난자가 20개(8.0%)이었다. 2. 하이알루로니다제 처리의 대상이 된 난자 수는 126개로서 대조군인 하이알루로니다제 비처리군과 비교하여 난구-관상세포 복합체의 성숙도에 따른 난자의 분포에 있어서 유의한 차이가 없었다. 3. 하이알루로니다제 처리로 난구-관상세포 복합체를 분리 분산시킨 후 난자 핵의 성숙도를 판정한 결과 성숙 난자 55개 중 MII가 34개(61.8%), 중등도 성숙난자 60개 중 MI이 14개(23.3%), 미성숙 난자 11개중 PI이 8개(72.7%)이었으며, 난구-관상세포 복합체의 성숙도와 비교하여 난자의 분포에 있어서 유의한 차이가 있었다. 4. 하이알루로니다제 처리군에서 수정 전 8시간의 추가 배양으로 MII가 68개(59.2%)에서 84개(73.0%)로 유의하게 증가되어 난자가 추가배양 중 감수분열을 계속하여 더욱 성숙되었다. 5. 난자의 수정율에 있어서 하이알루로니다제 처리군(58.3%)과 비처리군(61.8%) 사이에 유의한 차이가 없었다. 6. 수정란의 난할율에 있어서 하이알루로니다제 처리군(92.5%)과 비처리군(89.9%) 사이에 유의한 차이가 없었다. 7. 하이알루로니다제 처리군에서 성숙 난자의 수정율(69.1%)이 중등도 성숙 난자의 수정율(48.3%)에 비하여 유의하게 높았다. 8. 하이알루로니다제 처리군에서 수정 직전에 극체를 지니고 있는 성숙난자의 수정율(76.2%)이 극체를 지니고 있지 않은 난자의 수정율(9.7%)에 비하여 유의하게 높았다. 9. 하이알루로니다제 처리군과 비처리군의 수정란 136개 중 다정자진입 수정란은 하나도 없었다. 본 연구 결과 FSH와 hMG를 사용한 과배란유도 주기에서 채취된 난자의 난구-관상세포

From 36 patients undergoing in vitro fertilization(IVF) after controlled ovarian hyperstimulation with FSH/hMG/hCG, 248 oocyte-cumulus-corona cell complexes(OCCC) were retrieved transvaginally. Immediately after oocyte retrieval, the maturity of oocytes was assessed by the morphology of cumulus-corona cell complexes using microdroplet evaluation method: 113(45.6%) were mature, 115(46.4%) intermediate mature, and 20(8.0%) immature. To evaluate the relationship between the morphology of human cumulus-corona cell complex and the degree of oocyte maturation and to investigate the effect of cumuluscorona cell complex removal on in vitro fertilization(IVF) and development of oocyte, 122 OCCC were left intact and 126 OCCC were freed of their cumulus-corona cell complexes by hyaluronidase(300IU/ml) treatment for cumulus-corona cell complexes removal. The results were as follows: 1. There was no significant difference in the proportion of cumulus-corona cell complex morphology type between hyaluronidase treatment group and control group. 2. In hyaluronidase treatment group, 34 out of 55(61.8%) mature cumulus-corona cell complexes were in metaphase II by oocyte nuclear maturity, 14 out of 60(23.3%) intermediate mature cumulus-corona cell complexes metaphase I, and 8 out of 11(72.7%) immature cumulus-corona cell complexes in prophase I. There was significant difference between cumulus-corona cell complex morphology and oocyte maturity. 3. After 8 hours of preincubation of 115 denuded oocytes with mature and intermediate mature cumulus-corona cell complexes prior to insemination, the number of oocytes in metaphase II increased significantly from 68(59.1%) to 84(73.0%) in hyaluronidase treatment group. But 22(19.1%) were still in metaphase I and 9(7.9%) in prophase I. The maturation of oocytes progressed during preincubation regardless of the type of cumulus-corona cell complex morphology. 4. There was no significant difference in fertilization rate of oocytes between hyaluronidase treatment group(61.8%) and control group(58.3%). 5. There was no significant difference in cleavage rate of fertilized oocytes between hyaluronidase treatment group(92.5%) and control group(89.9%). 6. In hyaluronidase treatment group, fertilization rate of mature oocyte-cumulus-corona cell complexes(69.1%) was significantly higher compared with intermediate mature oocyte-cumulus-corona cell complexes(48.3%). 7. In hyaluronidase treatment group, fertilization rate of oocytes with polar body(metaphase II)(76.2%) was significantly higher compared with oocytes without polar body(metaphase I and prophase I)(9.7%). 8. There was no case of polyspermia in 136 fertilized oocytes. It is concluded that asynchrony between individual cumulus-corona cell complex morphology and oocyte maturation may occur in FSH/hMG/hCG stimulated cycles and that the removal of cumulus-corona cell complex does not seem to affect in vitro fertilization and cleavage of oocyte. It is suggested that hyaluronidase treatment of oocyte-cumulus-corona cell complex is a very accurate and useful method in the assessment of oocyte maturation.