인간의 체외수정과 배아이식 시술시 수정란의 냉동보존에 더좋은 결과를 얻기위한 기초적 연구의 일환으로 ICR계통의 생쥐를 과배란 유도하여 얻은 2세포기 수정란에 항동해제로 propanediol을 이용하였다. (1) 동결전 동결액에 sucrose첨가 여부, (2) 동결과 융해 과정에서 항동해제에 노출단계에 따른 탈수와 재수화과정 및 (3) 동결속도를 달리한 경우 등 세가지 변수에서 각각 배아발육에 미치는 영향을 알아보기 위하여 동결융해후 수정란의 정상성 지표로 포배기까지 체외배양시켜 얻은 외형적 발육형태를 판정한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 동결전 동결액에 sucrose의 첨가가 동결 수정란의 생존에 미치는 영향에 관한 비교에서, sucrose가 처치되지 않은 군과 처치된 군에서 사용된 2세포기 생쥐수정란의 회수율은 각각 98.2%와 82.9%였다. 융해후 포배기까지의 체외배양에서 정상 외형을 보이는 수정란은 sucrose로 처치된 경우에 69.0%로 처치되지 않았던 63.6%보다 약간 높았으나 양군 사이에 통계적 유의성은 없었다. 2. 항동해제 첨가 제거시 3단계법과 1단계법을 이용하여 각각 사용된 2세포기 생쥐 수정란은 70개와 72개였으며, 동결 융해 후 다시 회수할 수 있었던 수정란 은 과정이 간단한 1단계법이 95.8%로 82.9%의 3단계법보다 약간 높은 결과를 보여주었다. 그러나 융해 후 포배기까지 체외배양 시킨 후 정상외양을 갖춘 수정란의 비교는 3단계법에서 69.0%로 1단계법의 60.9%보다 약간 더 높은 결과를 보였으나, 양군 사이에 통계적인 유의성은 없었다. 3. 동결속도를 -0.5C/min와 -0.3C/min로 달리 하였을 경우에 동결수정란의 생존에 미치는 영향 비교에 사용된 2세포기 생쥐 수정란은 각각 52개와 70개였으며, 동결융해후 다시 회수할 수 있었던 수정란은 86.5%와 82.9%였다. 융해 후 포배기까지 체외배양에서 정상 외형을 보이는 수정란은 -0.3C/min의 동결속도가 이용된 군에서 60.9%로 -0.5C가 적용된 경우의 35.3%보다 높은 결과를 보였으며 통계적으로 유의성이 있었다. 이상과 같은 결과에서 동결전 동결액에 sucrose첨가여부와 동결과 융해과정에서 항동해제에 노출단계의 차이 등은 동결보존 후의 배아발육에 미치는 영향에 유의한 차이가 없었으며, 항동해제로 propanediol이 사용된 2세포기 생쥐 수정란의 동결에는 -0.5C/min보다 -0.3C/min의 동결속도가 더 좋은 결과를 나타내었다.

This study is one of the basic studies for the better successful outcome in which cryopreservation of embryos were developed during human IVF & ET and two cell mouse embryos were collected by hyperstimulation induction of ICR mouse, using propanediol as cryoprotectant. In order to know the effects of the following three varients on embryonal development, the external growing appearance, acquired by culture in vitro to blastocysts, was taken as normal index of embryo after freezing-thawing process, the three varients are sucrose addition to freezing solution before cryopreservation, the dehydration according to exposed step of cryoprotectant and rehydration in the freezing-thawing process, and different freezing rate. The results were as follows: 1. The comparison of use of three step method with one step method, during addition & removal of cryoprotectant, the each used two cell mouse embryos were 70 and 72. And embryos which can be recovered after freezing-thawing process, were 95.8 %, one step method which was slightly higher than 82.9 % in three step method. But in comparison of the observed, normal external morphological embryos after culture in vitro from thawing process to blastocysts, 69.0 % in three step method was resulted slightly higher than 60.9 % in one step method, but no statistical significance was seen between both groups. 2. In comparison of the effects that sucrose addition to freezing solution before freezing process had on survival of frozen embryos, numbers of two cell mouse embryo in sucrose-used group and non-sucrose used group were 56 and 70 respectively. And numbers of embryos which could be recovered after freezing-thawing process were 98.2 % and 82 % respectively. In culture in vitro, from thawing process to blastocysts, the observed, normal external morphological embryos were 69.0 %, in non-sucrose used group, but no statistical significance was seen. 3. In comparison of the effects that different freezing rate -0.5C/min and -0.3C/min had on frozen embryos survival, numbers