목 적 : 진균은 천식을 비롯한 각종 알레르기 질환의 주요 원인 중의 하나이며, 최근 호흡기 질환의 원인으로 Alternaria중요성이 자주 보고되고 있으나, 아직까지 면역학적 특성뿐만 아니라 호흡기 질환과의 연관성에 대한 국내 보고는 미홉한 실정이다. 이에 본 연구는 추출 방법이 어려운 것으로 알려져 있는 Alternaria의 항원 추출 방법을 연구 하고 주요 알레르기 항원을 분석하여 국내의 천식 환아에서 어떻게 작용하는지 알아보고자 본 연구를 시행하였다. 대상 및 방법 : KIST 생명공학연구소 유전자 은행-KCTC( Korean Collection for Type Cultures)에서 구입한 Alternaria of alternariafern 균주를 Potato-dextrose broth에서 10일간 배양하여 조항원(crude extracts)을 만든 후 SDS-PAGE를 시행한 후 Coomassie blue solution으로 염색하여 항원을 분석하였다. 대상 환아의 혈청으로 Alternaria 항원에 대한 항원 결합 특이 IgE 면역 검출을 시행하였다. 결 과 : 1) 1차 분리해낸 조항원으로 SDS-PAGE률 시행하여 항원을 분석한 결과 30개 이상의 항원이 관찰되었으며, 이중 5 kD, 28 kD, 31 kD, 34 kD, 65 kD, 70 kD의 단백이 강하게 관찰되었다. 2) 알레르기 피부 시험 결과 Alternaria 항원에 양성 반응을 보인 대상 환아의 혈청으로 항원 결합 특이 IgE 면역검출을 시행한 결과 이들 항원 중 10개 이상의 항원이 환자 혈청의 Alternaria 특이 IgE에 결합하였고, 그 중 34 kD, 31 kD, 16 kD의 단백이 강하게 관찰되었다. 결 론 : 이상으로 본 연구에서 시행한 진균 항원 추출 방법으로 Alternaria항원 추출의 가능성이 입증되었으며 추출된 Alternaria 조항원의 알레르기 항원성을 분석해 본 결과 90 kD, 70 kD, 65 kD, 34 kD, 31 kD, 28 kD, 16 kD의 항원이 주요 항원으로 관찰되어 국내에서도 Alternaria 항원이 천식 환아에서 주요 진균 알레르기 항원으로 작용함을 시사하고 있다.

Purpose : Mold allergy is the one of the major causes of atopic diseases including asthma, and the Alternaria exists year-round in Korea is recognized as an important cause of many atopic asthma. Recent studies stress the significance of Alternaria as a cause of respiratory problems although detailed knowledge on this organism is limited, especially the relationship of the fungi to respiratory ailments as well as the allergenic nature of this organism. Methods : The authors studied the purification methods of Alternaria allergen and examine how the allergen acts on atopic asthma. The Alternaria samples were cultured in potato-dextrose broth for 10 days, and a crude extract was obtained after dialysis and filtration. The crude extract was subjected to SDS-PAGE followed by staining, and the allergen was analyzed. Three subjects who showed positive allergy skin test to Alternaria were subjected to RAST and allergy skin test with the crude extract. Results : SDS-PAGE of the curde extract showed more than 30 allergenic bands, and among those, 5 kD, 28 kD, 31 kD and 34 kD bands were the major allergens, indicating that the purification method used in the present study produced an extract with almost all major allergens. In 3 patients with Alternaria allergy we carried out allergy skin test with crude extracts. All three subjects showed positive allergy skin test. Conclusion : The crude extract obtained major allergens including 70 kD, 65 kD, 34 kD, 31 kD, 28 kD and 16 kD allergens, and like the results reported outside Korea. Alternaria was proved to be a major allergen in atopic asthma in Korea as well.