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ELISA 법을 이용한 연어과 어류의 RVS 검출

Enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA ) for the detection of RVS ( Retrovirus of Salmonid )

오명주(Myung Joo Oh),길수수(Mamoru Yoshimizu)
  • : 한국어병학회
  • : 한국어병학회지 9권2호
  • : 연속간행물
  • : 1996년 12월
  • : 169-176(8pages)

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연어과 어류의 이상유영 원인 바이러스 RVS의 ELISA법에 의한 신속 진단 방법을 개발하였다. 주화세포를 이용한 바이러스 배양액 및 감염 무지개송어의 뇌조직 마쇄액을 사용하여 실험하였다. 바이러스 배양액을 이용한 ELISA법의 검출 감도 조사에서 최소 바이러스 감염가 검출 한계치는 10^(2.6) TCID_(50)/100 ㎕ 이었다. 또한, 인공감염어의 뇌조직 마쇄액 내의 RVS 항원도 검출 되었다. 본 방법은 현장에서의 RVS 감염어 조사에 효과적으로 사용되어질 수 있는 방법으로 생각 되어진다.
An indirect double antibody enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for rapid detection of a new virus isolated from abnormally swimming salmonid fish, RVS (Retrovirus of salmonid). Results using brain tissue homogenates, and infected cell cultures are described. The sensitivity of the methods is 10^(2.6) TCID_(50)/100 ㎕ of the examined cell culture fluid. The specificity was confirmed by the ELISA inhibition test and virological examinations. Viral antigen could be detected in artificially infected fish tissue homogenates. The assay will allow the diagnosis of RVS-infected fish within a day.

ECN

ECN-0102-2009-490-006041785


UCI

I410-ECN-0102-2009-490-006041785

간행물정보

  • : 수해양분야  > 수산생물학
  • : KCI 등재
  • : -
  • : 반년간
  • : 1226-0819
  • :
  • : 학술지
  • : 연속간행물
  • : 1988-2017
  • : 747


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1한국산 담수 어류에 기생하는 Chilodonella hexaticha 에 관하여

저자 : 김기홍(Ki Hong Kim),지보영(Bo Young Ji),박수일(Soo Il Park)

발행기관 : 한국어병학회 간행물 : 한국어병학회지 9권 2호 발행 연도 : 1996 페이지 : pp. 113-118 (6 pages)

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한국산 담수어류에 기생하는 섬모충류를 조사하기 위해 본 연구를 시행하였으며, 본 논문에서는 수온 22℃에서 붕어(Carassius carassius)로 부터 Chilodonella 속 기생성 섬모충을 검출하여 동정 분류하였다. 감염어의 체표, 지느러미 및 아가미에 무수히 많은 섬모충이 관찰되었으며 감염 부위에 과도한 점액이 분비된 것을 볼 수 있었다. 그리고 빈사 상태의 병어에서는 궤양이 형성된 것을 볼 수 있었다. 감염된 붕어로 부터 검출된 Chilodonella 충은 그 모양이 타원형으로 후면의 가장자리에 notch(V자형 새김)가 없고 배복(背腹) 방향으로 편평하였다. 충체의 길이는 30-45 ㎛이며 폭은 15-30 ㎛인 것으로 계측되었으며 가장자리의 섬모열은 왼쪽과 오른쪽이 각각 3-5열 이었다. 그리고 아치 모양의 오른쪽 섬모열은 직선의 왼쪽 섬모열보다 길이가 더 긴 것으로 나타났다. 충체 내부에는 직경 8-15 ㎛의 둥근 대핵과 직경 2-4 ㎛의 소핵이 있었으며, 복면(腹面) 앞부분에 있는 세포구는 충체 표면에서 직접 밖으로 열리며 세포인두와 연결된 것으로 관찰되었다. 세포구를 둘러싸고 있는 세포 인두는 10-16 가닥의 간상체(桿狀體)양 홈으로 이루어져 있으며 안쪽 끝이 굽어져 있는 것으로 관찰되었다. 충체는 2개의 수축포를 가진 것으로 관찰되었으며 각각 오른쪽 앞끝과 왼쪽 뒤끝에 위치했다. 그리고 수온 22℃에서 이 기생충의 번식은 단순한 이분열을 나타내었다. 이상의 결과로 부터 이 기생충은 Chilodonella hexasticha(Kiernik, 1909)로 분류할 수 있었다.

2남해안 양식산 조피볼락에 기생한 Microcotyle sebastisci 의 감염률 변동

저자 : 방인철(In Chul Bang),심두생(Doo Saing Sim),최상덕(Sang Duk Choi),공용근(Yong Gun Gong),백재민(J

발행기관 : 한국어병학회 간행물 : 한국어병학회지 9권 2호 발행 연도 : 1996 페이지 : pp. 119-126 (8 pages)

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1995년 4월부터 10월까지 전남 가막만과 경남 남해 해역에서 양식하는 조피볼락에 기생하는 아가미흡충 Microcotyle sebastisci의 기생률 변동 및 병리조직학적 변화를 조사하였다. M. sebastisci는 6∼7월에 나타나지 않았고, 주로 새엽 II∼III에 기생하였다. 기생된 부위는 미세한 출혈과 함께 점액이 다량 분비되었다. 남해의 경우 9월에 있어서 감염률, 상대 감염밀도, 평균 감염강도는 각각 40.0%, 30.7, 76.8을 나타내었다. 또한 가막만의 경우는 10월에 감염률, 상대 감염밀도, 평균 감염강도는 각각 46.0%, 40.5, 88.0으로 조사기간 중 가장 높게 나타났다. 병리조직학적 소견으로는 호흡상피세포의 증생, 비후, 새박판간상피세포의 중생과 새변의 곤봉화가 일어났다. 2차적으로 세균의 감염에 의한 아가미 부식도 관찰되었다.

3남해안 아귀 아가미에 기생하는 Acanthochondria spirigera 에 관하여

저자 : 최상덕(Sang Duk Choi),홍성윤(Sung Yun Hong),정춘구(Choom Goo Jung)

발행기관 : 한국어병학회 간행물 : 한국어병학회지 9권 2호 발행 연도 : 1996 페이지 : pp. 127-135 (9 pages)

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남해안 아귀, Lophiomus setigerus에서 기생성 요각류, Acanthochondria spirigera(Chondracanthidae, Poecilostomatoida)이 채집되었다. 이 종은 한국 미기록종이다. A. spirigera는 나선형으로 굽어지는 알주머니를 가짐으로서 Acanthochondria속 다른 종과 쉽게 구별된다. 또한 이 기생충은 5월을 제외하고 1∼4월에 아귀 아가미에서 채집되었다. 감염률과 상대 감염밀도는 1월에서 5월로 진행됨에 따라 점차 감소하였다. Acanthochondria spirigera는 아귀 구강에 제한적으로 기생하며, 숙주의 아가미에서 분비되는 점액질 등을 섭취하면서 서식한다. 그리고 수컷은 암컷의 복절에 작은 혹처럼 부착되어 있다.

4양식 조피볼락 치어의 대량폐사 원인인 비브리오병에 관하여

저자 : 김영길(Young Gill Kim),최동림(Dong Lim Choi),박성우(Sung Woo Park)

발행기관 : 한국어병학회 간행물 : 한국어병학회지 9권 2호 발행 연도 : 1996 페이지 : pp. 137-145 (9 pages)

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1995년과 1996년 충남의 조피볼락 종묘생산장에서 발생한 대량폐사의 원인을 조사하였다. 병어로 부터 분리된 원인균은 생화학적 및 생물학적 특성에 의해 Vibrio ordalii로 동정되었다. 당년생과 일년생 조피볼락에 대한 병원성 조사를 위하여 수온 18℃와 25℃에서의 감염실험을 실시한 결과 25℃의 일년생 시험어에 비해 18℃의 당년생 치어가 훨씬 높은 비율로 감염되었다. 이러한 결과는 양어장에서의 질병발생예를 포함한 현장조사 결과와 일치하고 있었다. 병어의 병리조직학적 관찰결과 아가미는 2차새변과 뇌의 모세혈관의 확장, 호흡상피의 박리, 간실질의 위축, 신장의 괴사가 관찰되었고 소화관계는 뚜렷한 병변이 없었다.

5고수온 고 pH 에서 뱀장어에 미치는 암모니아 급성독성의 병리조직학적 연구

저자 : 양한춘(Han Choon Yang),조재권(Jae Kwon Cho)

발행기관 : 한국어병학회 간행물 : 한국어병학회지 9권 2호 발행 연도 : 1996 페이지 : pp. 147-155 (9 pages)

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수온과 pH가 높은 조건에서 뱀장어에 미치는 암모니아 급성독성에 대하여 육안적인 면과 병리조직학적 변성을 관찰하였다. 육안 관찰 결과, 암모니아 무첨가구(0 ㎎/ℓ)에서는 pH 8.5이상에서 아가미의 암갈색화가 진행되었고 암모니아 20 ㎖/ℓ이상의 농도에서는 pH 7.5에서도 위와 같은 증상이 나타났다. pH 9.0에서는 암모니아 10 ㎎/ℓ이상의 농도에서 1시간 이내에 전부 폐사했다. 아가미에 대한 조직학적 관찰 결과는 암모니아 무첨가구의 pH 7.5에서만 정상 조직이 관찰되었고 수온과 pH의 상승, 암모니아 농도의 증가 및 노출시간의 경과에 따라 조직의 변성이 심해지는 경향을 보였다. 암모니아 무첨가구의 pH 8.0, 8.5에서도 2차새변의 부종과 만곡증상이 보였고 pH 9.0에서는 2차새변 상피의 박리증상이 나타난 것으로 보아 높은 pH 조건만으로도 병변을 일으키는 요인이 될 수 있는 것으로 사료된다. 조직학적 변성의 초기에는 2차새변의 부종과 만곡증상이 보이다가 상피세포의 박리와 괴사로 진행 되었으며, 특히 2차새변상피의 박리증상은 육안적으로 관찰되는 아가미의 암갈색으로 변색시점과 비슷한 시기에 관찰되었다. 암모니아 20 ㎖/ℓ이상에서는 pH 8.5, 수온 27℃ 조건에서 2차새변상피의 괴사가 일어났고, 수온 32℃에서는 노출시간이 경과하면서 폐사체가 생겼다.

6포르말린과 증성포르말린 약욕한 어류의 Formaldehyde 잔존량 측정과 병리학적 관찰

저자 : 조재권(Jae Kwon Cho),양한춘(Han Choon Yang)

발행기관 : 한국어병학회 간행물 : 한국어병학회지 9권 2호 발행 연도 : 1996 페이지 : pp. 157-168 (12 pages)

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이 실험에서는 조피볼락을 대상으로 중성 formalin과 formalin으로 약욕하여 잔존량과 잔존기간 및 병리 조직학적 변화를 관찰하고 온도가 미치는 영향에 대해서 알아보았다. formalin 과 중성 formalin의 잔존량은 15℃일 때 약욕 직후 약간의 차이를 제외하고는 별다른 차이를 보이지 않았다. 잔존기간은 수온 15℃와 25℃은 조건에서 각각 72 hr과 24 hr으로 온도의 영향을 많이 받는 것으로 나타났다. 어체에 미치는 독성은 중성 formalin보다 formalin이 강하게 나타나고 수온과 농도가 증가 할수록 조직에 미치는 영향이 심해졌다. formalin 약욕으로 인하여 아가미 조직에서는 부종과 상피세포의 박리, 뒤틀림, 괴사증상이 그리고 간에서는 부종과 핵농축, 공포화 현상이 나타나고 신장에서는 수증성 퇴행적 병변과 세뇨관 상피세포의 과립화 중상, 괴사가 일어나고 피부에서는 점액 세포의 증가와 표피의 괴사 및 피하조직과 진피층의 균열이 나타났다.

7ELISA 법을 이용한 연어과 어류의 RVS 검출

저자 : 오명주(Myung Joo Oh),길수수(Mamoru Yoshimizu)

발행기관 : 한국어병학회 간행물 : 한국어병학회지 9권 2호 발행 연도 : 1996 페이지 : pp. 169-176 (8 pages)

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연어과 어류의 이상유영 원인 바이러스 RVS의 ELISA법에 의한 신속 진단 방법을 개발하였다. 주화세포를 이용한 바이러스 배양액 및 감염 무지개송어의 뇌조직 마쇄액을 사용하여 실험하였다. 바이러스 배양액을 이용한 ELISA법의 검출 감도 조사에서 최소 바이러스 감염가 검출 한계치는 10^(2.6) TCID_(50)/100 ㎕ 이었다. 또한, 인공감염어의 뇌조직 마쇄액 내의 RVS 항원도 검출 되었다. 본 방법은 현장에서의 RVS 감염어 조사에 효과적으로 사용되어질 수 있는 방법으로 생각 되어진다.

8이상유영 증장을 나타내는 연어과 어유에서 분리된 새로운 바이러스의 분자생물학적 특성

저자 : 오명주(Myung Joo Oh)

발행기관 : 한국어병학회 간행물 : 한국어병학회지 9권 2호 발행 연도 : 1996 페이지 : pp. 177-183 (7 pages)

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이상유영 증상을 나타내는 연어과 어류에서 분리된 새로운 RNA 바이러스의 역전사 효소활성을 조사하였다. 정제바이러스는 래트로바이러스 특유의 유전자전환 효소인 역전사효소 (RTase) 활성을 가지고 있었다. Sucrose 밀도구배 초원심법으로 바이러스 밀도를 조사한 결과 1.16 g/㎖에서 밴드를 형성하고, 그 부분의 역전사효소 활성이 최고를 나타내었으며, 전자현미경 관찰결과 외막을 가진 크기 85 ㎚의 레트로바이러스 형태를 확인할 수 있었다. 인위감염 어류의 뇌 및 신장 조직내에 감염되어있는 바이러스를 대상으로 RTase 활성을 조사한 결과 높은 활성치를 확인할 수 있었다. 정제 바이러스의 구성 단백질은 전기영동법으로 확인한 결과 11종이었다. 이상의 결과, 새롭게 분리된 바이러스는 레트로바이러스의 일종인 것이 확인되었으므로 그 이름을 RVS (Retrovirus of salmonid)로 부를 것을 제안한다.

9양만장에서 분리된 Edwardseilla tarda 균에 대한 new quinolone 계 약물의 항균작용

저자 : 최민순(Min Soon Choi),박관하(Kwan Ha Park),최상훈(Sang Hoon Choi),김경호(Kyong Ho Kim),서영호(Y

발행기관 : 한국어병학회 간행물 : 한국어병학회지 9권 2호 발행 연도 : 1996 페이지 : pp. 185-193 (9 pages)

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지금까지 사용해온 많은 항균제들에 대한 내성의 획득은 어병세균의 박멸을 어렵게 만드는 심각한 문제를 야기하고 있다. 이 연구에서는 최근 인간의 세균성 질병치료 목적으로 사용하기 시작하거나 개발중인 new quinolone계 약물 14종을 대상으로 군산근교와 뱀장어(Anguilla japonica) 양만장 사육수에서 분리한 75종의 Edwardsiella tarda균에 대한 항균활성을 측정함으로써 장래의 신규 수산용 항균제 개발에 필요한 정보를 얻고자 시도하였다. Broth dilution assay에 의해 측정한 in vitro 항균활성시험에서 DU-6859는 MlC_(50) 값 0.05 ㎍/㎖로 가장 강력한 약효를 보여주었다. MIC_(50) 값 0.2-0.78 ㎍/㎖의 범위에 드는 약물들인 T-3762, Bay-y3118, ciprofloxacin, norfloxacin, ofloxacin 및 tosufloxacin은 그 다음으로 강력한 약물군을 형성하였다. 한편 difloxacin, sparfloxacin, fleroxacin, Q-35, amifloxain, lomefloxacin 및 enoxain 등은 약효가 약한 약물들로서 MIC_(50)값이 1.56-3.13 ㎍/㎖ 범위에 속하였다. 이들 항균제에 대해서 내성(MIC 값이 6.25 ㎍/㎖ 이상으로 정하였을 때)을 가지고 있는 균수는 T-3762 및 Bay-y3118은 3주, norfloxacin은 5주, tosufloxacin 12주, ciprofloxacin 및 ofloxacin 13주, sparfloxacin 16주, fleroxacin 19주, amifloxacin 및 lomefloxacin 31주, Q-35 36주, enoxacin 41주, difloxacin 44주로 각각 나타났다. DU-6859의 경우에는 내성이 있는 균주가 전혀 발견되지 않았다. 이 연구 결과들은 new quinolone계 약물들 사이에도 Edwardsiella tarda균에 대한 항균활성이 다양함을 시사하며 또한 향후 항균제 도입에 중요한 참고자료로 이용될 수 있을 것이다.

10뱀장어 병어로부터 분리한 Edwardsiella tarda 의 약제내성

저자 : 최민순(Min Soon Choi),장선일(Seon Il Jang),박관하(Kwan Ha Park),최상훈(Sang Hoon Choi),조정곤(J

발행기관 : 한국어병학회 간행물 : 한국어병학회지 9권 2호 발행 연도 : 1996 페이지 : pp. 195-201 (7 pages)

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군산근교의 양만장에서 애드와드병에 이환된 뱀장어로부터 총 96균주의 E.tarda균을 분리한 후 이들 분리균의 약제감수성 검사를 실시하고 아울러 내성균의 내성인자 전달 시험을 실시하였다. 공시한 모든 균주는 SM, AK, NF 및 GM등에는 100% 감수성을 보였으나, 대부분의 균주가 SD(86균주), AM(84균주), PM(80균주), NA(67균주), OT(44균주) 및 OA(37균주) 등의 내성을 보였다. 내성유형은 20유형으로서 거의 모든 균주가 2제 이상의 다제내성을 보였으며, 그중 SD-AM-PM-NA-OA(16균주), SD-AM-PM-NA(14균주), SD-AM-PM-NA-OT-OA(12균주), SD-AM-PM-OT(10균주) 및 SD-AM-PM-NA-OT(8균주) 유형등이 고빈도로 출현하였다. 내성균주의 내성인자 전달 빈도는 94균주중에서 78균주가 단계에서 6제까지의 다제내성인자의 전달을 보였다. 그중 AM 및 AM-PM-NA유형(8균주), PM,SD 및 AM-SD유형(6균주), AM-PM, PM-SD 및 AM-SD-OT유형(4균주)등이 고빈도 출현을 보였다. 이러한 결과는 양만장에서 다양한 항균제를 사용하였기 때문에 다제내성현상이 확산되어진 것으로 사료된다.

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1권 1호(1998) ~ 20권 4호 (2017)

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1권 1호(1968) ~ 50권 6호 (2017)

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